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组织匀浆管线式高剪切均质机
一、组织破碎
组织破碎提取法是在室温液体溶剂中利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透技术,数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒,从而达到快速提取的效果。
二、机械法高剪切组织匀浆的制备
1、取组织块(0.2g~1g)少可到2~5mg,在冰冷的盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入5或10ml的小烧杯内
2、用移液管量取预冷的匀浆介质(ph7.4,0.01mol/L?Tris-HCL,?0.0001MOL/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖0.8%的氯化钠溶液)或者用0.86%冷盐水,匀浆介质或盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍,用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆介质或盐水于烧杯中,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中)。
3、匀浆的方式有多种:手工匀浆、机器匀浆、超声匀浆、反复冻融。
手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆容器中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。?机器匀浆:用组织捣碎机10000~28000r/min上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用40安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。?反复冻融:培养或者分离的细胞可以用以上的方法匀浆,也可以反复冻溶3次左右(即让细胞加适量的低渗液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,溶解,再结冰,再溶解,反复3次左右),但有部分酶活力会受影响。
取少量组织匀浆做涂片(直接涂片、染色均可),显微镜下观察细胞是否磨破,若没有破则可以延长匀浆时间或增加冻融次数。
4、将制备好的10%匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10~15分钟,若检测ATP酶,则只需要1000转/分,离心5分钟,将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀。?根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种测定。
三、组织匀浆管线式高剪切均质机
XMD2000/4是一款集研磨、分散、均质、乳化于一体的分散设备,在多个领域和行业有着突出的应用。如化工行业:白炭黑、环氧树脂等超细研磨分散机;食品行业:植物蛋白饮料、胶原蛋白提取等;都可以获得良好的研磨分散细化的效果。
XMD2000/4研磨分散机,电机功率:4kw,转速高达18000rpm,处理在0-300L,设备体积较小,可直接放置实验台上操作。专为实验室研发,模拟生产流程,为量产提供可靠的数据论证。该中试型型机器和大型量产机型配置相同,且分散头的种类及相应线速度也相同,中试过程中的工艺参数在量产化之后不要重新调整,而将机器型号升级过程中的风险降到更低。
XMD2000/4研磨分散机是由胶体磨+分散机一体化而成的设备,先研磨后分散,效率高效果好。
设备结构:
研磨分散机是由胶体磨分散机组合而成的高科技产品。
第一级由具有精细度递升的三级锯齿突起和凹槽。定子可以无限制的被调整到所需要的转子之间距离。在增强的流体湍流下。凹槽在每级口可以改变方向。
第二级由转定子组成。分散头的设计也很好的满足不同粘度的物质以及颗粒粒径的需要。在线式的定子和转子(乳化头)和批次式机器的工作头设计的不同主要是因为在对输送性的要求方面,特别要引起注意的是:在粗精度、中等精度、细精度和其他一些工作头类型之间的区别不光是指定转子齿的排列,还有一个很重要的区别是不同工作头的几何学征不一样。狭槽宽度以及其他几何学特征都能改变定子和转子工作头的不同功能。
以下为型号表供参考:
型号 |
标准流量 L/H |
输出转速 rpm |
标准线速度 m/s |
马达功率 KW |
进口尺寸 |
出口尺寸 |
XMD2000/4 |
400 |
18000 |
44 |
4 |
DN25 |
DN15 |
XMD2000/5 |
1500 |
10500 |
44 |
11 |
DN40 |
DN32 |
XMD2000/10 |
4000 |
7200 |
44 |
22 |
DN80 |
DN65 |
XMD2000/20 |
10000 |
4900 |
44 |
45 |
DN80 |
DN65 |
XMD2000/30 |
20000 |
2850 |
44 |
90 |
DN150 |
DN125 |
XMD2000/50 |
60000 |
1100 |
44 |
160 |
DN200 |
DN150 |